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    解析雞elisa檢測試劑盒標準曲線做不好的原因

    發布時間:2021-12-28   點擊次數:381次
      雞elisa檢測試劑盒標準曲線做欠好的原因分析,剛剛觸摸Elisa實驗,研討雞透明質酸(HA)相關目標的實驗,做完雞透明質酸(HA)實驗后反應標準曲線的梯度都欠好。剛加完顯色劑的時分梯度還算明顯,但是顯色比較淺,跟著時刻延伸(大約6、7分鐘)往后梯度就不明顯了。停止反應后測得的值梯度就沒有了。
     
      為此,我公司技術員對雞elisa檢測試劑盒標準曲線做不好的原因做出分析:
      1、剛加完顯色劑時梯度明顯:顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的;
      2、酶濃度太高,導致最終顯色結果都是高的;
      3、包被-酶標系統不匹配或許酶標的非特異反應太強,或許酶標儀讀數規劃不夠;
      4、樣本中有可以催化底物的物質,沒洗下來;
      5、建議:包被、酶標重新做梯度,先用較低的濃度把梯度探究好,然后再優化靈敏度,最終調出所需的靈敏度、線性規劃;
      6、有條件的話,可以把酶免的蛋白系統移植到板式化學發光上,加完底物三分鐘讀數;
      7、蛋白系統靈敏度夠的話,顯色十分鐘就差不多了;
      8、酶是自己標的這種情況的,HRP比例不要太高。
     
      完好的雞elisa檢測試劑盒首要包含:
      1、酶的底物;
      2、已包被抗原或抗體的固相載體;
      3、酶符號的抗原或抗體;
      4、結合物及標本的稀釋液;
      5、洗滌液;
      6、陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參閱規范品和控制血清;
      7、酶反應停止液,常用的HRP反應停止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的終究體積而異,在板式ELISA中一般選用2mol/L。
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