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    豬ELISA檢測試劑盒基本原理與蔗糖封閉原理分析

    發布時間:2021-04-25   點擊次數:714次
      豬ELISA檢測試劑盒基本原理:
     
     ?、倏乖蚩贵w能吸附到固相載體表面,并保持其免疫學活性;
     
     ?、诳乖蚩贵w可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,仍保持其免疫學和酶學活性;
     
     ?、勖附Y合物與相應抗原或抗體結合后,可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。
     
      豬ELISA檢測試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液,一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點,蔗糖封閉的原理:
     
      1、實驗中,蔗糖本身沒有封閉作用;
     
      2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等。
     
      3、加蔗糖的主要目的是保護ELISA板子吸附(包被)的蛋白,起到“保護劑"的作用。
     
      4、蔗糖溶液一般在ELISA板子經過BSA封閉后加,當然也有將蔗糖加到封閉液中同時進行處理;那一種更好需要你實驗后來驗證。但多數選擇前者。
     
      封閉劑還可用5%的脫脂乳(市售即可),0.4%的明膠,但是實驗表明前者比較好,后者不容易洗干凈未結合上的明膠。
     
      封閉劑的原理就是與酶聯板上未結合抗原或抗體的微孔中用封閉劑封閉上,結合抗體或抗原的時候就不會產生非特異結合了,不會影響。
     
      tween的作用:雖然不能單獨封閉,但和BSA在封閉時會起到清洗非特異性結合或結合不牢固的蛋白的作用,假如抗體包被在板上會出現YY-
     
      豬ELISA檢測試劑盒實驗中是以抗原和抗體的免疫反應為基礎,ELISA試劑以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實驗,把各種ELISA配置方法匯總如下:
     
      (1) ELISA實驗包被緩沖液;
     
      (2) ELISA實驗洗滌緩沖液;
     
      (3) ELISA實驗稀釋液;
     
      (4)ELISA實驗終止液;
     
      (5)ELISA底物緩沖液;
     
      (6)ELISA實驗TMB(四甲基聯苯胺)使用液;
     
      (7) ELISA實驗ABTS使用液(8)ELISC;
     
      值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,不適合長期保存。
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