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    大鼠血管生成素1ELISA檢測試劑盒操作步驟

    發布時間:2021-06-24   點擊次數:468次

    大鼠血管生成素1ELISA檢測試劑盒操作步驟

     

    樣本處理及要求:
    1.  血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
    2.  血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
    3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
    4.  細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

     

    大鼠血管生成素1ELISA檢測試劑盒操作步驟

    有以下操作技巧:
    A、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
    B、合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
    C、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
    D、要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。
    E、樣品稀釋液應用加液器加注,并經常校對其準確性。


    儲存條件和試劑盒準備:
    1)有效期內的試劑如開封后未用完,請2-8°C 保存。
    2)過期的試劑請不要用,打開后的試劑2-8°C 保存。
    3)酶標包被板必須2-8°C 保存,如有未用完的酶標包被板,打開的鋁箔袋須密封并2-8°C 保存。
    4)試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。

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