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    昆蟲elisa檢測試劑盒的樣本一定要滿足這些要求

    發布時間:2020-09-22   點擊次數:637次
      昆蟲elisa檢測試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)測定樣品中昆蟲保幼激素(JH)的水平。向預先包被了昆蟲保幼激素(JH)單克隆抗體的酶標孔中加入保幼激素(JH),溫育;溫育后,加入生物素標記的抗保幼激素(JH)抗體,再與鏈霉親和素-HRP結合,形成免疫復合物,再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶,然后加入底物A、B,產生藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺與樣品中昆蟲保幼激素(JH)的濃度呈正相關。
     

      昆蟲elisa檢測試劑盒的樣本要求:
      1、不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
      2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存或根據存放,時間做相應溫度調整,但應避免反復凍融,(由于樣本種類過多,每個單位處理方式不一樣,本說明書不做詳細介紹)。
     
      昆蟲elisa檢測試劑盒的操作流程:
      1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
      2、設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL。
      3、樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
      4、除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
      5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次。
      6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
      7、每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
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