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    犬elisa檢測試劑盒在日常應用中對樣本的處理方法說明

    發布時間:2020-08-20   點擊次數:671次
      通常我們可用于犬elisa檢測試劑盒的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細胞培養上清或組織勻漿液等,不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。正確的處理樣本是保證ELISA檢測的正確性和準確性的*步,下面簡單介紹一下。

      1、細胞培養上清:
      取細胞培養上清到離心管,1000×g離心20min,除去細胞碎片及雜質,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
     
      2、細胞裂解液:
      a、吸去培養板內的培養基,用胰酶消化細胞,加適量培養基將細胞從培養板上吹下來。懸浮細胞可省略。
      b、收集細胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養基,用預冷的PBS潤洗3次。
      c、加入適量的預冷PBS或細胞裂解液重懸細胞。通常6孔板一個孔的細胞量需要150~250μL PBS重懸。
      d、將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,反復凍融幾次,使細胞充分裂解。也可將樣品進行超聲破碎,以達到裂解的目的。
     
      3、血清:
      血清是zui常用于犬elisa檢測試劑盒的一類樣本,處理也比較簡單。
      用無熱原、無內毒素的試管或離心管采集血液標本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過夜,使血清析出。4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
      采血過程中應避免溶血,因為紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質,在以HRP為標記的犬elisa檢測試劑盒中會有非特異性的顯色,而導致檢測的不準確性。同時也應避免細菌污染,因為菌體內可能含有內源性的HRP從而導致檢測的假陽性。
     
      4、血漿:
        用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標本,標本采集后30min內4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。
      常用的抗凝劑為EDTA、肝素鈉和枸櫞酸鈉等,檢測時還應仔細閱讀試劑盒說明書,檢查試劑盒是否對抗凝劑有特殊要求。
      在犬elisa檢測試劑盒中除了包被外,一般需進行45加樣。在定性測定中有時不強調加樣量的準確性,例如規定為加樣一滴。此時應該使用相同口徑的滴管,保持準確的加樣姿勢,使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中則加樣量應力求準確。標本和結合物的稀釋液應按規定配制。加樣時應將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出現氣泡。
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